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HPLC und Reinheit: wie Reinheit gemessen wird

Kurz erklärt

HPLC ist eine Trennmethode, die die Stoffe in einer Probe voneinander trennt. So lässt sich messen, wie viel Prozent einer Probe das gewünschte Peptid ist und wie viel Beimengungen enthalten sind. Das Ergebnis steht oft als Reinheitsprozentsatz auf einem CoA.

Was HPLC ist

HPLC steht für high-performance liquid chromatography. Es ist eine Labormethode, die die verschiedenen Stoffe in einer Probe voneinander trennt. Sobald sie getrennt sind, kann jeder Stoff gemessen werden. HPLC ist eine der am häufigsten genutzten Methoden, um die Reinheit eines Peptids zu prüfen.

Wie eine HPLC-Messung funktioniert

Die Probe wird gelöst und durch ein langes Rohr mit feinem Material gedrückt, die Säule genannt. Verschiedene Stoffe bewegen sich mit unterschiedlicher Geschwindigkeit durch die Säule. Ein Detektor am Ende erfasst jeden Stoff, sobald er austritt. Das Ergebnis ist ein Diagramm mit Peaks. Jeder Peak steht für einen Stoff, und seine Größe zeigt, wie viel davon vorhanden ist.

Wie Reinheit berechnet wird

Die Reinheit wird durch den Vergleich der Peaks bestimmt. Die Fläche des Hauptpeaks wird mit der Gesamtfläche aller Peaks verglichen. Nimmt der Hauptpeak X Prozent der Gesamtfläche ein, wird die Reinheit als X Prozent angegeben. Die übrigen (100 − X) Prozent bestehen aus anderen Stoffen in der Probe.

Was ein Reinheitsprozentsatz aussagt und was nicht

Ein Reinheitsprozentsatz gibt den Anteil des gewünschten Stoffs im Vergleich zu anderen Stoffen an, die die Methode erkennen kann. Er bestätigt für sich allein nicht die Identität des Stoffs. Er misst auch nicht, was die Methode nicht erfassen kann. Für die Identität ergänzt ein Labor oft die Massenspektrometrie.

HPLC auf einem Analysenzertifikat

Das HPLC-Ergebnis steht meist auf dem Analysenzertifikat, oder CoA. Das CoA nennt die gemessene Reinheit und enthält oft auch das Diagramm. Beim Lesen des CoA sehen Sie die angegebene Reinheit und wie sie gemessen wurde.

Wissenswertes

HPLC steht für high-performance liquid chromatography.
Eine Reinheit von X Prozent bedeutet, dass (100 − X) Prozent aus anderen Stoffen bestehen.
HPLC misst das Verhältnis zwischen Peaks, nicht das absolute Gewicht eines Stoffs.

Häufige Fragen

Was bedeutet HPLC?

High-performance liquid chromatography, eine Methode, um Stoffe in einer Probe zu trennen und zu messen.

Was ist eine gute Reinheit für ein Forschungspeptid?

Welche Reinheit eine Studie braucht, hängt von der Laboranwendung ab; das CoA der Charge zeigt den gemessenen Wert.

Misst HPLC auch die Identität?

Nein, HPLC zeigt die Reinheit. Für die Identität wird oft die Massenspektrometrie genutzt.

Wo finde ich das HPLC-Ergebnis?

Auf dem Analysenzertifikat (CoA), das zu einer Probe gehört.

Quellen

Nur für Labor- und Forschungszwecke. Nicht zum Verzehr durch Mensch oder Tier und nicht für Diagnostik oder therapeutische Anwendung bestimmt.