5 trucchi per mantenere più a lungo stabili i Suoi peptidi

Mantenere i peptidi stabili più a lungo si riduce, in pratica, a cinque abitudini: conservare al fresco e al buio, suddividere in aliquote le soluzioni di lavoro, evitare i cicli di congelamento e scongelamento, lavorare in condizioni sterili ed etichettare e datare con precisione. Ciascuno di questi passaggi contrasta un meccanismo di degradazione specifico che può compromettere la qualità di un campione di ricerca.

1. Conservare al fresco e al buio

Temperatura e luce sono i due fattori esterni più importanti nel determinare la velocità dei processi di degradazione come idrolisi, ossidazione e deamidazione. Il liofilizzato non aperto deve essere conservato in congelatore per periodi più lunghi (−20 °C, in laboratorio talvolta −80 °C), al riparo dalla luce in vetro ambrato o in una confezione esterna che blocchi la luce. Una soluzione di lavoro preparata per un test in vitro va in frigorifero (2–8 °C), mai lasciata sul banco a temperatura ambiente.

2. Aliquotare prima dell'uso

Suddividendo una soluzione di lavoro in diverse piccole porzioni sigillate singolarmente (aliquote) subito dopo la preparazione, è necessario scongelare e utilizzare una sola porzione alla volta. Il resto rimane intatto, congelato o refrigerato, il che riduce al minimo l'esposizione dell'intero volume alle fluttuazioni di temperatura e alle aperture ripetute.

3. Evitare i cicli di congelamento e scongelamento

Ogni volta che una soluzione si scongela e ricongela, si verificano differenze di concentrazione localizzate e stress meccanico dovuto alla formazione di cristalli di ghiaccio, che possono accelerare l'aggregazione e la degradazione. Tra le misure pratiche:

• lavorare con piccole aliquote in modo che una porzione venga utilizzata tutta in una volta
• lasciare scongelare completamente un'aliquota su ghiaccio o a 2–8 °C anziché a temperatura ambiente
• non ricongelare mai un'aliquota già scongelata e parzialmente utilizzata

4. Lavorare in condizioni sterili e pulite

La contaminazione microbica può far degradare una soluzione più rapidamente della sola degradazione chimica. Durante l'apertura, la preparazione della soluzione e l'aliquotazione, lavorare in condizioni pulite (ad esempio sotto una cappa a flusso laminare o con solventi filtrati), utilizzare materiale di laboratorio pulito come pipette e provette sterili, e limitare il numero di volte in cui un contenitore viene aperto.

5. Etichettare e datare correttamente

Ogni aliquota e ogni flacone dovrebbero riportare numero di lotto, data di preparazione, solvente e concentrazione. Senza queste informazioni diventa impossibile risalire all'età o alla storia di un campione, compromettendo la tracciabilità e la riproducibilità dei risultati di ricerca. Un sistema di etichettatura coerente, collegato al certificato di analisi del lotto pertinente, dovrebbe essere parte integrante della gestione del laboratorio.